O meio DMEM/F12 combina a formulação básica do meio DMEM com os elementos nutritivos enriquecidos do meio F12, contendo uma grande variedade de oligoelementos. É amplamente utilizado na cultura de diversas células de mamíferos. É também empregado frequentemente como base para o desenvolvimento de meios livres de soro, sendo adequado para a cultura de células de mamíferos e cultura de densidade de clones com baixo teor de soro.
O produto contém múltiplos aminoácidos, vitaminas, sais inorgânicos e outros ingredientes essenciais para a cultura celular, mas não contém proteínas, lípidos ou fatores de crescimento, devendo ser utilizado com soro ou aditivos livres de soro.
Especificações Técnicas e Composição
Forma do Produto: Pó
Concentração da Mistura: 11,99 g/L
D-Glicose: 3151 mg/L
Piruvato de Sódio: 0,5 mM
Vermelho de Fenol: 8,1 mg/L
L-Glutamina: Não contém (Negativo)
HEPES: Não contém (Negativo)
Bicarbonato de Sódio (): Não contém na formulação em pó (deve ser adicionado durante o preparo)
Condições de Armazenamento (Pó): 2 °C a 8 °C, protegido da luz
Condições de Envio: Temperatura ambiente (Room Temperature)
Validade do Pó: 36 meses
Apresentação: 5 × 1 L
Instruções de Preparação (Por Litro)
- Água de Preparo: Utilize água purificada, ultrapura ou água para injeção (WFI), mantendo a temperatura controlada entre 20 °C e 30 °C durante o processo.
- Volume Inicial: Meça 90% do volume final desejado (por exemplo, adicione 900 mL de água para 1 L de meio) no sistema de mistura. Inicie a agitação evitando a geração de bolhas (recomenda-se potência por unidade de volume superior a ).
- Adição do Pó: Pese com precisão o pó na proporção de 11,99 g para cada 1 L e adicione ao recipiente. Agite por mais de 20 minutos até dissolver todo o pó completamente.
- Adição do Bicarbonato de Sódio (): Após a solução ficar límpida, adicione 2,483 g de Bicarbonato de Sódio () por litro. Continue agitando por 5 a 10 minutos até dissolver, e complete o volume com água ultrapura até atingir 100% (1 L).
- Ajuste de pH: Se necessário, ajuste o pH para a faixa de 7,20 a 7,30 com solução de ou . (Nota: A filtração aumentará ligeiramente o pH, pelo que o valor nesta etapa deve ser inferior ao alvo final de 7,20-7,40).
- Esterilização: A solução preparada deve ser esterilizada utilizando uma membrana de filtração com porosidade de Controle de Qualidade: Pode retirar uma pequena amostra do meio líquido para inspeção de qualidade, utilizando-o apenas após aprovação.
- Armazenamento da Solução Pronta: O meio líquido filtrado deve ser utilizado imediatamente ou armazenado em frascos de vidro, frascos de cultura (PET) ou sacos de armazenamento descartáveis com revestimento de barreira de oxigénio a 2–8 °C ao abrigo da luz. O meio líquido tem uma validade de 1 ano sob estas condições.
Precauções e Recomendações
Produto exclusivo para investigação científica ou investigação complementar, não se destina a diagnóstico e tratamento.
Utilize bata de laboratório, luvas descartáveis e máscara durante a operação.
Para garantir o desempenho ideal do produto, cumpra rigorosamente as condições de armazenamento recomendadas.
